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Malay - Objetivo de la tinción especial:
- Demostración de depósitos de hierro férrico
- Aplicaciones de diagnóstico:
- Presencia de hierro férrico en el tejido: hemocromatosis
- Material suministrado para las encuestas:
- Tejido hepático cortado a 3 µm
- Control recomendado:
- Hígado
1. Perls Azul de Prusia Método A
Reactivo – origen comercial desconocido, a menos que se especifique:
| 1. 2% Ácido clorhídrico | |
| a) Ácido clorhídrico | 2 ml |
| b) Agua destilada | 98 ml |
| 2. 2% Ferrocianuro de potasio | |
| a) Ferrocianuro de potasio | 2 gramos |
| b) Agua destilada | 100 ml |
| 3. Solución de trabajo (preparar fresco antes de cada uso) | |
| Mezcle partes iguales de ácido clorhídrico 2% y ferrocianuro de potasio 2% |
| 4. 0.1% Rojo rápido nuclear | |
| a) Rojo rápido nuclear | 0,1 gramos |
| b) Sulfato de aluminio | 5 gramos |
| c) Agua destilada | 100 ml |
| 5. Solución de tinción de eosina |
Método:
- Desparafinar la sección y llevarla a agua destilada.
- Filtrar la solución de trabajo de ferrocianuro de potasio y ácido clorhídrico en un recipiente Coplin y teñir los portaobjetos durante 10 minutos.
- Enjuagar con agua destilada.
- Lavar bien con agua.
- Contraste con rojo nuclear rápido durante 5 minutos.
- Lavar bien con agua.
- Deshidratar, aclarar y montar la sección.
Resultados:
Depósitos de hierro – azul
Fondo: varios tonos de rojo
2. Perls Azul de Prusia Método B
Reactivo – origen comercial desconocido, a menos que se especifique:
| 1. Solución de azul de Prusia: | |
| a) Ferrocianuro de potasio acuoso 2% | 25 ml |
| Conservar a 4 grados. Estable durante 3 meses. | |
| b) Ácido clorhídrico acuoso 2% | 25 ml |
| Estable indefinidamente a temperatura ambiente. | |
| Mezcle A y B. Prepare el producto fresco antes de usar. Estable durante 2 horas. | |
| 2. Solución de pararosanilina | |
| a) Solución madre de pararosanilina | |
| i) Pararosanilina | 2 gramos |
| ii) Metanol | 200 ml |
| Caducidad: 3 meses. Anote la fecha en el frasco. Conservar a temperatura ambiente. | |
| b) Solución de trabajo de pararosanilina | |
| i) Solución madre de pararosanilina | 1 ml |
| ii) Agua destilada | 50 ml |
| Preparar fresco. Estable durante 2 horas. | |
| 3. 1% Safranina acuosa o eosina alcohólica |
Método:
1. Desparafinar la sección y llevarla al agua.
2. Lave la sección con agua destilada.
3. Transfiera las secciones a una solución de azul de Prusia recién preparada durante 20 minutos a temperatura ambiente.
4. Enjuague con agua destilada.
5. Lavar bien con agua del grifo.
6. Contrateñir con eosina durante 30 segundos.
7. Lavar bien con agua del grifo.
8. Deshidratar, aclarar y montar la sección.
Resultados:
Hierro férrico – azul
Núcleos – Rojo
Descargo de responsabilidad:
Estos métodos se ofrecen únicamente como guía. Los laboratorios que deseen implementar estos métodos deben realizar una validación interna antes de su uso. El RCPAQAP no realiza ninguna afirmación ni otorga garantía alguna sobre la precisión o el rendimiento de estos métodos.
Referencias
Estudio técnico general del RCPAQAP 2019 1.
Charles J, Churukian. Teoría y práctica de las técnicas histológicas. John D. Bancroft; Marilyn Gamble. 6El edición. Nueva York, NY: Churchill Livingstone; 2008:233-236.
Ciencias de la vida de Solarbio, “Kit de tinción de hierro azul de Prusia (con eosina)”, 2005-2021 Solarbio, http://solarbio.net/goods-476.html [consultado en febrero de 2025].