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Malay - Objectif de la teinture spéciale :
- Démonstration de gisements de fer ferrique
- Applications diagnostiques :
- La présence de fer ferrique dans les tissus – hémochromatose
- Matériel fourni pour les relevés :
- Tissu hépatique coupé à 3 µm
- Contrôle recommandé :
- Foie
1. Perls Bleu de Prusse Méthode A
Réactif – source commerciale inconnue, sauf indication contraire :
| 1. 2% Acide chlorhydrique | |
| a) Acide chlorhydrique | 2 ml |
| b) Eau distillée | 98 ml |
| 2. 2% Ferrocyanure de potassium | |
| a) Ferrocyanure de potassium | 2 g |
| b) Eau distillée | 100 ml |
| 3. Solution de travail (préparer frais avant chaque utilisation) | |
| Mélanger des parts égales d'acide chlorhydrique 2% et de ferrocyanure de potassium 2% |
| 4. 0.1% Rouge nucléaire rapide | |
| a) Rouge nucléaire rapide | 0,1 g |
| b) Sulfate d'aluminium | 5 g |
| c) Eau distillée | 100 ml |
| 5. Solution de coloration à l'éosine |
Méthode:
- Déparaffiner la section et l'amener à l'eau distillée.
- Filtrer la solution de travail de ferrocyanure de potassium et d'acide chlorhydrique dans un bocal Coplin et colorer les lames pendant 10 minutes.
- Rincer à l'eau distillée.
- Bien laver à l'eau.
- Contre-coloration avec du rouge nucléaire rapide pendant 5 minutes.
- Bien laver à l'eau.
- Déshydrater, clarifier et monter la section.
Résultats:
Dépôts de fer – bleu
Contexte – différentes nuances de rouge
2. Perls Bleu de Prusse Méthode B
Réactif – source commerciale inconnue, sauf indication contraire :
| 1. Solution de bleu de Prusse : | |
| a) 2% ferrocyanure de potassium aqueux | 25 ml |
| À conserver à 4 degrés. Stable 3 mois. | |
| b) 2% acide chlorhydrique aqueux | 25 ml |
| Stable indéfiniment à température ambiante. | |
| Mélanger les ingrédients A et B. Préparer frais avant utilisation. Stable pendant 2 heures. | |
| 2. Solution de pararosaniline | |
| a) Solution mère de pararosaniline | |
| i) Pararosaniline | 2 g |
| ii) Méthanol | 200 ml |
| Durée de conservation : 3 mois. Noter la date sur le flacon. À conserver à température ambiante. | |
| b) Solution de travail de pararosaniline | |
| i) Solution mère de pararosaniline | 1 ml |
| ii) Eau distillée | 50 ml |
| Préparer frais. Stable pendant 2 heures. | |
| 3. 1% Safranine aqueuse ou éosine alcoolique |
Méthode:
1. Déparaffinez la section et amenez-la à l'eau.
2. Lavez la section dans de l’eau distillée.
3. Transférer les sections dans une solution de bleu de Prusse fraîchement préparée pendant 20 minutes à température ambiante.
4. Rincer à l'eau distillée.
5. Bien laver à l'eau du robinet.
6. Contre-coloration à l’éosine pendant 30 secondes.
7. Bien laver à l'eau du robinet.
8. Déshydrater, clarifier et monter la section.
Résultats:
Fer ferrique – bleu
Noyaux – Rouge
Clause de non-responsabilité:
Ces méthodes sont fournies à titre indicatif uniquement. Les laboratoires qui souhaitent mettre en œuvre ces méthodes doivent procéder à une validation interne avant utilisation. Le RCPAQAP ne fait aucune déclaration ni ne donne aucune garantie quant à l'exactitude ou aux performances de ces méthodes.
Références
Enquête technique générale 2019 RCPAQAP 1.
Charles J, Churukian. Théorie et pratique des techniques histologiques. John D Bancroft; Marilyn Gamble. 6ème édition. New York, NY : Churchill Livingstone ; 2008 : 233-236.
Solarbio life sciences, « Kit de coloration au bleu de Prusse (avec éosine) », 2005-2021 Solarbio, http://solarbio.net/goods-476.html [consulté en février 2025].