Malay 
English 
Spanish 
French - Matlamat noda khas:
- Tunjukkan kedua-dua asid dan mukopolisakarida neutral dalam sampel tisu
- Aplikasi diagnostik:
- Esofagus Barrett, mesothelioma, aterosklerosis
- Bahan yang dibekalkan untuk tinjauan:
- Blok komposit tisu gastrik dan kolon dipotong pada 3µm
- Kawalan yang disyorkan:
- Sampel yang mengandungi mucin neutral dan berasid – tisu daripada saluran gastro-usus
Kaedah PAS Alcian Blue
Reagen – sumber komersial tidak diketahui, melainkan dinyatakan:
| 1. Larutan amilase 0.5% | |
| a) α-amilase | 0.5 g |
| b) Air suling | 100 mL |
| Larutkan enzim di dalam air dengan goncangan lembut. Sediakan segar (boleh digunakan semula sepanjang hari). Gunakan sama ada Sigma α-amilase jenis VI-B daripada pankreas babi atau α-amilase daripada Bacillus subtilis (persediaan komersial – MP Biomedicals). |
|
| 2. Alcian Blue pH 2.5 – *Nota: sentiasa tambah asid ke dalam air* | |
| a) Biru Alcian | 1.0 g |
| b) Air suling | 97 mL |
| c) Asid asetik glasier | 3 mL |
| Larutkan pewarna dalam air suling, tambah asid, gaul rata. Tapis ke dalam botol reagen dan tapis sebelum digunakan. Secara alternatif, gunakan reagen yang disediakan secara komersil (persediaan komersial – Diagnostik Titik Penjagaan – POCD) – 1% Alcian Blue dalam 3% Asid Asetik pH 2.5. |
|
| 3. Asid Berkala 1.0% | |
| a) 50% larutan asid berkala | 10 mL |
| b) Air suling | 500 mL |
| Simpan dalam peti sejuk. | |
| 4. Reagen Schiff (persediaan komersial – Biostain Australia) | |
| Simpan dalam peti sejuk. Sila semak tarikh luput sebelum digunakan. |
| 5. Haematoxylin |
| 6. Asid alkohol |
| 7. Air paip Scott |
Kaedah:
*Prarawatan diastase boleh digunakan untuk menghapuskan kehadiran glikogen, sebelum pewarnaan dengan warna biru Alcian*
Kaedah jika Diastase digunakan dengan Alcian Blue:
- Bahagian Bing kepada air suling.
- Rawat bahagian dengan larutan amilase selama 20 minit.
- Basuh dengan baik dalam air paip yang mengalir selama 5 minit.
- Teruskan dengan Alcian Blue PAS.
Kaedah pewarnaan Alcian Blue:
- Bahagian Dewax dan bawa ke air.
- Warnakan slaid dengan warna biru Alcian selama 15 minit.
- Basuh dengan baik dalam air paip yang mengalir selama 2 minit.
- Bilas dengan air suling.
- Oksidasi dalam Asid Berkala 1% selama 5 minit.
- Basuh dalam air suling.
- Rawat dengan reagen Schiff selama 10 minit.
- Basuh dalam air paip yang mengalir selama 5 minit.
- Counterstain dengan haematoxylin selama 1 minit.
- Basuh dengan baik dalam air paip yang mengalir.
- Bezakan dengan alkohol asid selama 3 – 5 saat.
- Basuh dalam air.
- Nukleus biru dalam air paip Scott.
- Basuh dalam air.
- Dehidrasi, jelas & lekapkan.
Keputusan:
Musin berasid – biru
Musin neutral – magenta
Campuran di atas – biru/ungu
Nukleus - biru tua
* Jika Diastase digunakan untuk mengeluarkan glikogen, glikogen akan kekal tidak tercemar dalam ABPAS + Diastase.*
Penafian:
Kaedah ini bertujuan sebagai panduan sahaja. Makmal yang ingin melaksanakan kaedah ini harus melakukan pengesahan dalaman sebelum digunakan. RCPAQAP tidak membuat sebarang tuntutan atau jaminan untuk ketepatan atau prestasi kaedah ini.
Rujukan
Tinjauan Umum Teknikal RCPAQAP 2020 3.
Russel B Myers, Jerry L Fredenburgh dan William E Grizzle. Teori dan amalan Teknik Histologi. John D Bancroft; Marilyn Gamble. 6ke edisi. New York, NY: Churchill Livingstone; 2008:172-174.
McManus JFA, Mowry RW. Kesan penetapan pada histokimia karbohidrat. Jurnal Histokimia & Sitokimia. 1958;6(5):309-316.